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2022年11月1日,中國科學院微生物研究所孔照勝研究組在Nature Plants上發表研究論文(A Legume Kinesin Controls Vacuole Morphogenesis for Rhizobia Endosymbiosis),揭示了驅動蛋白nKCBP調控根瘤菌內共生的分子細胞機制。

KCBP(Kinesin-like Calmodulin-Binding Protein)是植物特有的微管馬達蛋白,具有同時結合微管和微絲的能力,調控細胞骨架動態重構和細胞形態建成。有趣的是,KCBP基因在豆科植物中特異發生基因加倍,並且演化出根瘤中富集表達的拷貝nKCBP,並為根瘤菌所利用,調控結瘤固氮。利用基因編輯技術獲得了蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)nkcbp突變體,表現出生長缺陷(圖1a)和固氮能力顯著下降(圖1b)。進一步對根瘤的半薄切片、超薄切片進行觀察發現,野生型根瘤的侵染細胞具有典型的中央大液泡(圖1c和2a),而nkcbp突變體則含有大量隨機分布的未融合小液泡(圖1d和2b),甚至有些侵染細胞內共生體不能分化、共生體膜加厚。運用連續超薄切片掃描電鏡成像(Automatic collector of ultrathin sections scanning electron microscopy, AutoCUTS-SEM)技術,對野生型和突變體液泡結構進行了三維重構(圖2)。結合活細胞成像和免疫熒光染色,證實了nKCBP具有保守的生化功能,同時結合微管和微絲。進一步發現,與野生型相比,nkcbp突變體侵染細胞中細胞骨架輻射狀排布被破壞而呈現隨機、無序的排布模式。綜上所述,nKCBP通過調節細胞骨架動態重構來調控液泡發生和共生界面形成(圖3),從而控制根瘤菌內共生與高效固氮。

圖1:nkcbp突變體生長表型和共生表型分析
圖2:野生型和nkcbp突變體液泡三維結構
圖3:nKCBP通過調節細胞骨架動態重構來調控液泡發生和共生界面形成,從而控制根瘤菌內共生與高效固氮的工作模型
中國科學院微生物研究所助理研究員張霞霞為論文第一作者,孔照勝研究員為通訊作者。本研究得到了國家傑出青年科學基金、中國科學院戰略性先導科技專項和基礎研究領域青年團隊計劃及植物基因組學國家重點實驗室自主研究課題經費的資助。Nature Plants同期發表了題為nKCBP controls central vacuole formation for symbiosome development的Research Briefing專欄推薦文章,發表了審稿人和Nature Plants編輯的官方點評。
文章鏈接:https://www.nature.com/articles/s41477-022-01261-4
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