2022年11月1日,中國科學院微生物研究所孔照勝研究組在Nature Plants上發表研究論文(A Legume Kinesin Controls Vacuole Morphogenesis for Rhizobia Endosymbiosis),揭示了驅動蛋白nKCBP調控根瘤菌內共生的分子細胞機制。
KCBP(Kinesin-like Calmodulin-Binding Protein)是植物特有的微管馬達蛋白,具有同時結合微管和微絲的能力,調控細胞骨架動態重構和細胞形態建成。有趣的是,KCBP基因在豆科植物中特異發生基因加倍,並且演化出根瘤中富集表達的拷貝nKCBP,並為根瘤菌所利用,調控結瘤固氮。利用基因編輯技術獲得了蒺藜苜蓿(Medicago truncatula)nkcbp突變體,表現出生長缺陷(圖1a)和固氮能力顯著下降(圖1b)。進一步對根瘤的半薄切片、超薄切片進行觀察發現,野生型根瘤的侵染細胞具有典型的中央大液泡(圖1c和2a),而nkcbp突變體則含有大量隨機分布的未融合小液泡(圖1d和2b),甚至有些侵染細胞內共生體不能分化、共生體膜加厚。運用連續超薄切片掃描電鏡成像(Automatic collector of ultrathin sections scanning electron microscopy, AutoCUTS-SEM)技術,對野生型和突變體液泡結構進行了三維重構(圖2)。結合活細胞成像和免疫熒光染色,證實了nKCBP具有保守的生化功能,同時結合微管和微絲。進一步發現,與野生型相比,nkcbp突變體侵染細胞中細胞骨架輻射狀排布被破壞而呈現隨機、無序的排布模式。綜上所述,nKCBP通過調節細胞骨架動態重構來調控液泡發生和共生界面形成(圖3),從而控制根瘤菌內共生與高效固氮。


